分子生物学实验室简介
第一篇：分子生物学实验室简介
实验一 分子生物学实验室常用仪器设备简介
实验室主要仪器，设备的简介及使用方法 微量移液器
微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。
微量移液器有多种规格，在移液器量程范围内能连续调节读数。移液器常见的四种规格分别是：
0.5～10μl(读数窗显示0.5～10.0,每转1档为0.1μl); 10～100μl(读数窗显示10.0～100, 每转1档为1μl); 20～200μl(读数窗显示20～200, 每转1档1μl); 100～1000μl(读数窗显示100～1000, 每转1档为5μl).
量液的操作步骤：
1. 将微量移液器装上吸头(不同规格的移液器用不同的吸头) 2. 将微量移液器按钮轻轻压至第一停点; 3. 垂直握持微量移液器，使吸嘴浸入液样面下几毫米，千万不要将吸嘴直接插到液体底部; 4. 缓慢、平稳地松开控制按钮，吸上样液。否则液体进入吸嘴太快，导致液体倒吸入移液器内部，或吸入体积减少; 5. 等一秒钟后将吸嘴提离液面
6. 平稳地把按钮压到第一停点，再把按钮压至第二停点以排出剩余液体; 7. 提起微量移液器，然后按吸嘴弹射器除去吸嘴。
量液操作注意问题：
1. 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。
2. 一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。
3. 不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。 4. 不要用大量程的移液器移取小体积样品。
5.
移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。 低温台式高速离心机 离心机的分类
低速：每分钟几千转
高速：每分钟1 ~ 3万转
超速：每分钟3万转以上
离心机的功能：
分离，纯化 低速：细胞等大分子
高速：DNA，蛋白等
超速: 病毒，蛋白等，根据用途又可分为分析超速离心 机和制备超速离心机。
低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段 基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术
本实验室所用离心机为台式高速离心机(IBM)，配有角式转头：24×1.5ml;极限转速20000rpm
台式高速离心机使用步骤
1、把离心机放置于平面桌或平面台上，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平衡。
2、打开门盖，将离心管放入转子内，离心管必须成偶数对称放入，且要事先平衡，完毕用手轻轻旋转一下转子体，使离心管架运转灵活。
3、关上门盖，注意一定要使门盖锁紧，完毕用手检查门盖是否关紧。
4、插上电源插座，按下电源开关(电源开关在离心机背面，电源座上方)。
5、设置转子号、转速、时间：
在停止状态下时，用户可以设置转子号、转速、时间，此时离心机处于设置状态，停止灯亮、运行灯闪烁;按下启动离心开始(常用，最高转速为13000r/min，时间最长为20分钟);
注意：对应的转子一定要设置在相应的转速范围内，不可超速使用，否则对试管或转子有损坏。
6、离心机时间倒计时到“0”时，离心机将自动停止，当转子停转后，打开门盖取出离心管，关断电源开关。 注意事项：
1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。
2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与台面接触和均匀受力，以免产生振动。
3、离心前，离心管加液要平衡，若加液差异过大运转时会产生大的振动，此时应停机检查，使加液符合要求，离心试管必须成偶数对称放入。
4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停机处理。
5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样 恒温气浴摇床 使用及性能：
摇床(振荡器)为实验室的常规设备。广泛用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养、发酵、杂交、生物化学反应以及酶和组织研究等。实验室常用的液体摇匀，微生物、细菌和细胞培养。
SHK-99-Ⅱ型台式空气恒温摇床，采用微电脑控制系统，温度范围：室温+5℃～60℃，精度±0.5℃;时间范围：1分钟～99小时59分钟;转速范围：60RPM～250RPM 操作程序：
1)样品瓶牢固放入弹簧夹中
2)接通电源开关，仪器进入准备状态
3)参数设定，(设定温度、时间、转速等参数 )
4) 按启动键仪器开始工作，按暂停键可暂停托盘的旋转;
5)按下控制面板的电源键两秒，显示屏显示消失，关闭电源总开关 超净工作台 使用及性能：
超净工作台为分子生物学无菌操作提供可能，分为垂直送风和水平送风两种。
超净台由三相电机作鼓风动力，功率145～260W左右，将空气通过由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来，形成连续不断的无尘无菌的超净空气层流，即所谓“高效的特殊空气”，它除去了大于0.3μm的尘埃、真菌和细菌孢子等等。超净空气的流速为24～30m/min，这已足够防止附近空气可能袭扰而引起的污染，这样的流速也不会妨碍采用酒精灯或本生灯对器械等的灼烧消毒。工作人员就在这样的无菌条件下操作，保持无菌材料在转移接种过程中不受污染。
操作程序：
1)使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。
2)接通电源，提前30分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区内工作台表面积累的微生物，15分钟后，关闭紫外灯，开启送风机。
3)工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。
4)操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。
5)最后开启工作台紫外灯，照射消毒30分钟后，关闭紫外灯，切断电源。
注意事项：
操作时一定注意关掉紫外，防止对实验人员造成伤害 灭菌锅
使用及性能：
细菌和细胞培养以及核酸等有关实验所用的试剂、器皿及实验用具，应严格灭菌;应将实验器械，试剂等进行高压消毒。对于经过导入DNA重组分子的菌株，操作后必须进行严格的高压消毒灭活处理 ;大批实验物品、试剂、培养基等可以使用大型消毒器进行消毒。一些不能经受高压、高温消毒的试剂可用滤器滤膜除菌，器皿可用紫外线照射、75%乙醇或0.1%的十二烷基硫酸钠(SDS)浸泡消毒。所有的细胞培养、细菌培养的操作，都应在紫外线消毒后的超净工作台中进行
操作程序：
1)开盖：转动手轮，使锅盖离开密封圈，添加蒸馏水刚没至板上
2)通电：将控制面板上电源开关按至ON处，若水位低(LOW)红灯亮
3)堆放物品：需包扎的灭菌物品，体积不超过200mm×100mm×100mm为宜，各包装之间留有间隙，堆放在金属框内，这样有利于蒸汽的穿透，提高灭菌效果 ，灭菌时间： 121℃， 20min，;如为液体，液体必须装在可耐高温的玻璃器皿中，且不可装满，2/3即可， 121℃， 18-20min 3)密封高压锅：推横梁入立柱内，旋转手轮，使锅盖下压，充分压紧
4)设定时间和温度，开始灭菌
5)灭菌结束，所有东西放入干燥箱干燥，排尽水气 注意事项：
如是手动的灭菌锅，在灭菌过程中，应注意排净锅内冷空气，锅内冷空气如排放不净，会影响灭菌效果，达不到彻底灭菌的目的。 要等温度降为“0”，才可打开灭菌锅锅盖;
由于高压蒸汽灭菌时，要使用温度高达120℃、两个大气压的过热蒸汽，操作时，必须严格按照操作规程操作，否则容易发生意外事故。
PCR仪
PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括在三种不同温度进行DNA变性、引物复性、DNA聚合酶催化的延伸反应的三个过程
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等等 操作步骤
1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”,显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单
准备执行程序。
2、放入样品管，关紧盖子。
3、如果要运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》， 用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则屏幕显示
按《Proceed》选择ENABLE，则开始执行程序。
4、如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed》，
1)命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认(如何输入字母、数字)。
2)输入程序步骤：名字输入后，确认，然后输入相关程序
5、输入完成的程序后，到RUN-ENTER菜单，选择新程序，开始运行。
6、其它：用《pause》可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。
用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。
如何设置一个PCR程序：
一般分为8步：
1、预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用 5min。
2、变性：一般用95℃，30s~2min,一般 45s~1min。
3、退火：温度自定，30s~2min。
4、延伸：72℃，对于〈1kb=1min,每增加 1kb加1min。
5、循环数：一般25～35个循环(2,3,4步循环)。
6、最终延伸：72℃，5～15min。
7、保存：4℃，时间设为0。
8、END。
电泳仪
电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类，自由界面电泳不需支持物，如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等，这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物，常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等，分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳
应用电泳法可以对不同物质进行定性或定量分析，或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备。
实验室所用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪(北京六一仪器厂) 操作程序：
1. 首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。 2.按电源开关，显示屏出现“欢迎使用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪…”等字样后，同时系统初始化，蜂鸣4声，设置常设置。屏幕转成参数设置状态，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。
3.确认各参数无误后，按“启动”键，启动电泳仪输出程序。在显示屏状态栏中显示Start! 并蜂鸣4声，提醒操作者电泳仪将输出高电压，注意安全。之后逐渐将输出电压加至设置值。同时在状态栏中显示“Run”，并有两个不断闪烁的高压符号，表示端口已有电压输出。在状态栏最下方，显示实际的工作时间(精确到秒)
4.电泳结束，仪器显示：“END”，并连续蜂鸣提醒。此时按任一键可止鸣 注意事项
1. 电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要应先断电，以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端，以防漏电。
2. 仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有可能导致仪器损坏。
3. 由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 4.使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外事故。
作业
列出分子生物学常用仪器的名称，用途及操作时的注意事项。 一，微量移液器
微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。 量液操作注意问题
1. 未装吸嘴的微量移液器绝对不可用来吸取任何液体。
2. 一定要在允许量程范围内设定容量，千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围，否则会造成损坏。
3. 不要横放带有残余液体吸嘴的移液器。 4. 不要用大量程的移液器移取小体积样品。
5.
移液器使用完后，将刻度调到最大刻度，收藏。 二，离心机的功能：
分离，纯化 注意事项：
1、离心机在运转时，不得移动离心机，不要打开门盖。
2、安放离心机的台面应坚实平整，四只橡胶机脚都应与台面接触和均匀受力，以免产生振动。
3、离心前，离心管加液要平衡，若加液差异过大运转时会产生大的振动，此时应停机检查，使加液符合要求，离心试管必须成偶数对称放入。
4、若运转时有离心试管破裂，会引起较大振动应立即停机处理。
5、离心机彻底停止后，才可开盖，取样 三，恒温气浴摇床 使用及性能：
摇床(振荡器)为实验室的常规设备。广泛用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养、发酵、杂交、生物化学反应以及酶和组织研究等。实验室常用的液体摇匀，微生物、细菌和细胞培养。 四超净工作台 使用及性能：
超净工作台为分子生物学无菌操作提供可能，分为垂直送风和水平送风两种。 注意事项：
操作时一定注意关掉紫外，防止对实验人员造成伤害 五.灭菌锅 使用及性能：
细菌和细胞培养以及核酸等有关实验所用的试剂、器皿及实验用具，应严格灭菌;应将实验器械，试剂等进行高压消毒 注意事项：
如是手动的灭菌锅，在灭菌过程中，应注意排净锅内冷空气，锅内冷空气如排放不净，会影响灭菌效果，达不到彻底灭菌的目的。 要等温度降为“0”，才可打开灭菌锅锅盖;
由于高压蒸汽灭菌时，要使用温度高达120℃、两个大气压的过热蒸汽，操作时，必须严格按照操作规程操作，否则容易发生意外事故。 六.PCR仪
PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括在三种不同温度进行DNA变性、引物复性、DNA聚合酶催化的延伸反应的三个过程
PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等等 七.电泳仪
电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类，自由界面电泳不需支持物，如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等，这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物，常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等，分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳
注意事项
1. 电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要应先断电，以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端，以防漏电。
2. 仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有可能导致仪器损坏。
3. 由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。
4.使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外事故。
实验二
琼脂糖凝胶电泳的制备及核酸检测
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多，应用非常广泛，它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点，已成为分离和鉴定核酸的常用方法。 实验目的
掌握琼脂糖凝胶电泳的原理; 学习琼脂糖凝胶电泳的操作。 实验原理
琼脂糖是一种天然聚合长链状分子，沸水中溶解，45℃开始形成多孔性刚性滤孔，凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。
DNA分子在碱性环境中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与分子筛效应。不同DNA，其分子量大小及构型不同，电泳时的泳动率就不同，从而分出不同的区带。琼脂糖凝胶电泳法分离DNA，主要是利用分子筛效应，迁移速度与分子量的对数值成反比关系。
溴化乙锭(EB)为扁平状分子，在紫外照射下发射荧光。EB可与DNA分子形成EB-DNA复合物，其发射的荧光强度较游离状态EB发射的荧光强度大10倍以上，且荧光强度与DNA的含量成正比。用肉眼观察，可检测到5 ng以上的DNA。 1.影响DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素：
1)DNA分子大小
迁移速率U与logN成反比(N为碱基对数目)。分子大小相等，电荷基本相等(DNA结构重复性)。分子越大，迁移越慢。等量的空间结构紧密的电泳快(超螺旋>线性DNA) 2) 琼脂糖浓度：不同的凝胶浓度，分辨不同范围的DNA Agarose： 0.5%： 1-30 kb;
0.7%： 0.8-12 kb
1.2%： 0.4-7 kb;
1.5%： 0.2-3 kb. 3)DNA构象：一般迁移速率超螺旋环状>线状DNA>单链开环。
4)所加电压：低电压时，线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。使分辨效果好，凝胶上所加电压不应超过5V/cm
5)碱基组成与温度：一般影响不大4 -30 ℃
6)嵌入染料的存在：降低线性DNA迁移率，(不提倡加在电泳液中) 7)电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的迁移率，无离子存在时，核酸基本不泳动，离子强度过大产热厉害，熔化凝胶并导致DNA变性，一般采用1×TAE，1×TBE，1×TPE(均含EDTA pH8.0)。
2.溴化乙锭(EB)为致癌剂，操作时应戴手套，尽量减少台面污染。
3.电泳指示剂：核酸电泳常用的指示剂有两种，溴酚蓝(bromophenol blue, Bb)呈蓝紫色;二甲苯晴(xylene cyanol, Xc)呈蓝色，它携带的电荷量比溴酚蓝少，在凝胶中的迁移率比溴酚蓝慢。 仪器和试剂 仪器
微量移液器，电泳仪，电泳槽，微波炉
试剂
琼脂糖：1.0%;
电泳缓冲液(50 × TAE 电泳缓冲液取Tris24.2g ，冰醋酸5.7ml ， 0.25mol/L EDTA (pH8.0)20ml ，加蒸馏水至100ml )
EB：5 µl / 100 ml TBE 电泳材料：标准分子量核酸(DL2000) 操作步骤
(1)制胶(以20 mL为例)
a. 称取0.2 g 琼脂糖，加入20 ml 的1XTAE缓冲液(pH 8.0)，摇匀;
b. 微波炉加热，至琼脂糖完全溶解(要防止过热溢出三角瓶);
c.将制胶板放入制胶槽中，插入适当的梳子，将溶解的琼脂糖(约50℃)加入2ul EB后，混均匀，倒入其中，直至厚度为4～6 mm(如有气泡要把气泡赶出)，在室温下冷却凝固(约30~ 45 min);
d.小心垂直向上拔出梳子,以保证点样孔完好,将胶板置于电泳槽中。 (2)点样
用微量移液器将5 µl含蓝色染液的 DL2000 加入点样孔下部。 (3)电泳
打开电源开关，调节电压至3~5 V/cm(约100 V)，可见到溴酚蓝条带由负极向正极移动，约30-40分钟后即可观察结果。 (4)观察
将电泳好的胶置于紫外透射检测仪上，打开紫外灯，可见到橙红色核酸条带，根据条带粗细，可粗略估计该样品DNA的浓度。如同时有已知分子量的标准DNA进行电泳，则可通过线性DNA条带的相对位置初步估计样品的分子量。 实验结果及分析
实验结果不是很理想，可能的原因是小组间的点样间隔时间太长以至于样品扩散造成结果的不理想另一个人原因是点样没有到位造成的，第二种原因的可能性大一点。 作业
做琼脂糖凝胶电泳应注意哪些问题。
答：1，溴化乙锭(EB)为致癌剂，操作时应戴手套，尽量减少台面污染 制琼脂糖凝胶时在特定的操作区操作。
2，微波炉加热使琼脂完全溶解要防止过热溢出三角瓶，要在瓶上加一张纸。
3，制胶时插入适当的梳子，当琼脂糖冷却凝固后，要小心垂直向上拔出梳子，小心样孔被弄破
4，点样时，要把样品点入点样孔下部，电泳时条带平整明亮。 5，要正确使用微量移液器，等器材视点用后的结果不致出现错误。
第二篇：内蒙古自治区哺乳动物生殖生物学及生物学技术重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地简介
1997年被批准为内蒙古自治区首批重点实验室之一，2000年被教育部批准为哺乳动物繁殖生物学与生物技术重点实验室，2010年被科技部批准为省部共建国家重点实验室培育基地，依托单位内蒙古大学。
研究方向：哺乳动物早期胚胎发育机理的研究，早期胚发育过程中的表观遗传调控机制，家畜繁殖生物学与繁殖技术，哺乳动物精子发生及精原干细胞研究，家畜体细胞克隆与转基因技术研究，胚胎冷冻保存技术与种质资源保存研究。
学科优势：是国家动物学重点学科，内蒙古大学动物硕士、博士学位授权点，博士后科研流动站和长江学者计划特聘教授岗位，自治区生殖生物学重点学科，内蒙古大学国家"211工程"计划重点建设学科。
基础设施：科研条件达到国际先进水平拥有先进的仪器设备、国家级标准化实验动物设施和多个体外受精与胚胎移植(IVF-ET)技术产业化示范基地。科研用房面积4500平方米，仪器设备总值1300多万元。目前本实验室拥有一座国内规模最大的良种牛“试管胚”保存库。
研究队伍：本实验室负责人李光鹏教授，长江学者特聘教授。实验室现有固定科研人员17人，其中中国工程院院士1人、长江学者1人和副高以上人员8人，博士10人，硕士3人。平均年龄37岁，形成了一支高素质、具有开拓精神和敬业精神的年轻的学术梯队。1
人才培养：注重人才培养，先后有二十人次青年学者被选派出国进修。多年来为国家培养了博士35人，硕士58人。
科研成果：近五年来，累计承担国家重大科技专项，国家“863”、“973”计划项目，国家发改委产学研合作高新技术产业化示范项目等国家级、省部级和国际合作项目，共计58项，取得多项成果。在国内率先开展了以牛、羊体外受精技术为中心的家畜生殖生物学及生物技术的研究，成功地培育出我国首批“试管绵羊”和“试管牛”，填补了我国在该领域的空白;提出了牛、羊“试管胚”工厂化生产和规模化移植的一整套技术路线，其卵母细胞的体外成熟率、受精率、发育率、冷冻保存存活率和胚胎移植成功率等各项技术指标均达到了国际先进水平;在鄂尔多斯恩格贝生态建设示范区建立了绒山羊生物技术繁育基地，利用体外受精、胚胎移植及胚胎冷冻保存技术进行了绒山羊快速繁育研究，培养出500多只高产优质白绒山羊，开创了从1只供体母羊一次得到12只羔羊的纪录;创造性地提出了“试管内杂交育种”的新概念、新技术，培育出了“试管内杂交育种”第三代羔羊，为家畜育种理论与技术的发展做出了新的贡献;在体细胞克隆和转基因家畜技术研究方面取得了突破性进展，建立起了牛体细胞克隆技术以及通过转基因克隆的方法制备乳腺生物反应器的一系列工艺流程，获得了体细胞克隆胚胎的生产方法，培育出3头体细胞克隆牛犊和1头转基因克隆牛犊。
发表论文252篇，其中三大检索机构收录25篇、国内核心期刊发表207篇;出版专著5部。申请专利9项，其中获得授权专利2项。获奖总数12项，其中获国家自然科学二等奖1项、国家科技进步二等奖1项，省部级奖7项，其他3项。
开放服务能力：本着资源共享的原则，大型仪器设备已列入内
蒙古自治区大型仪器协作网，向社会进行开放，提高使用效率。同时还以多种形式对国内外研究机构和学者开放，设有开放课题科学基金，资助在本实验室中进行并与本实验室研究方向相关的基础研究和应用基础研究，利用实验室的仪器设备进行单独或合作研究工作。对那些意义重大、有创新思想、属于学科前沿和有应用前景的研究项目予以优先支持，促进科技合作和学术与人才交流。
实验室主任：李光鹏教授、生殖生物学博士、博导
联系方式：0471-4994329
E—mail: guangpengli@yahoo.com
依托单位网址：http://
内蒙古大学科技处处长：王志平
联系方式：0471-4992538
E—mail: ndkjc8@imu.edu.cn
第三篇：分子生物学实验室实验器材清单
分子生物学实验室所需试剂、耗材清单
1、普通化学试剂，共计约2.89万。
名
称 95%乙醇AR 无水乙醇AR DEPC EDTA二钠AR 柠檬酸钠AR 柠檬酸三钠AR L-精氨酸BR Tris 苯酚AR 变色硅胶 冰乙酸AR 丙酮AR 二甲苯AR 二乙醇胺cp 甘露醇AR 甘油AR 高碘酸AR 甲醇AR 磷酸氢二钠AR 硫酸AR 硫酸铵AR 硫酸镍AR 氯仿AR 氯化钾AR 氯化镁 氯化钠AR 氯金酸AR 莽草酸 明胶CP 钼酸
钼酸铵AR 尿素AR 牛肉浸膏BR 硼酸AR 氢氧化钠AR 去离子甲酰胺 三乙醇胺 碳酸钙AR 单 位 单价(元)
瓶 7 瓶 10 瓶 150 瓶 50 瓶 27 瓶 15 瓶 126 瓶 220 瓶 36 瓶 19 瓶 10 瓶 18 瓶 20 瓶 38 瓶 15 瓶 28 瓶 240 瓶 8.4 瓶 11 瓶 14 瓶 10 瓶 102 瓶 28 瓶 20 瓶 18 瓶 10 瓶 196 瓶 390 瓶 35 瓶 290 瓶 380 瓶 18 瓶 90 瓶 18 瓶 10 瓶 780 瓶 25 瓶 23 购置数量
金额(元)
20 140 20 200 10 1500 9 450 9 243 9 135 5 630 10 2200 9 324 18 342 9 90 5 90 1 20 1 38 1 15 2 56 2 480 5 42 1 11 3 42 17 170 1 102 10 280 2 40 1 18 10 100 1 196 3 1170 1 35 1 290 1 380 5 90 1 90 10 180 10 100 4 3120 1 25 1 23 碳酸钠AR 碳酸氢钠AR 无水碳酸钾AR 硝酸 硝酸银 销酸钴 盐酸AR 乙酸钾AR 乙酸锌AR 蔥酮 AR 消毒/双氧水30% AR Trypan Blue Tween-20 硝酸钾 硫酸铁 氢氧化钾 甲醛 500ml 硼砂
乳酸 500ml 硝酸钙 乙酸钠 异丙醇 AR 异戊醇 AR SDS 合计
瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶
12 16 22 10 350 48 14 45 36 68 11 32 20 15 15 15 8 12 27 12 46 10.45 40 38
1 1 1 1 5 1 2 1 1 1 4 1 1 1 1 1 15 5 1 1 4 8 8 40 12 16 22 10 1750 48 28 45 36 68 44 32 20 15 15 15 120 60 27 12 184 83.6 320 1520 28890.6
2、分子生物学试剂, 共计约4.5万元。
名称 La高保真酶 高保真Taq HS 高保真Taq HS GC Buffer DnaseI Rnase A 100bp maker 150bp Maker Marker DL500 Marker DL1000 Marker r-ecot14 I digest 去磷酸化酶 X-GLUC
单位
支 支 支 支 支 支 支 支 支 支 支 瓶
单价(元) 购置数量 金额(元)
250 700 700 431
130 250 250 80 80 500 300 450
5 2 2 9 3 9 9 10 10 1 1 1
1250 1400 1400 3879 390 2250 2250 800 800 500 300 450 Klenow酶 pMD18-T Vetcor T4 DNA聚合酶 T4连接酶 TRNzol 总RNA提取试剂
IPTG X-gal dNTP (10mM) 普通Taq酶(1000U) DNA ladder (100bp，1kb等，50ug) 琼脂塘 TEMED 丙烯酰胺
溴酚兰 矿物油
Platinum高保真Taq酶
合计
支 支 支 支 盒 瓶 瓶 支 支 支 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 支
108 280 108 400 420 80 600 80 80 180 300 40 70 40 90 1500
1 2 1 5 2 10 10 20 20 10 10 20 30 1 6 5
108 560 108 2000 840 800 6000 1600 1600 1800 3000 800 2100 40 540 7500 87930
3、内切酶, 共计约0.41万。
名称 BamHI DraI EcoRI EcoRV HindIII KpnI Pst I XbaI 合计
单位 支 支 支 支 支 支 支 支
单价(元) 购置数量 金额(元)
10 77 65 75 77 65 120 70
9 5 18 9 5 9 2 8
90 385 1170 675 385 585 240 560 4090
4、试剂盒, 共计约1.84万元。
名称 单位 单价(元)
Promega T-easy载体A1380 盒 1400 Promega T-载体试剂盒 盒 900 质粒提取试剂盒(50次) 盒 300 一次性胶回收纯化试剂盒
盒 1000 (50次)
RNA提取试剂盒(50次) 盒 800 RNA纯化试剂盒(50次) 盒 360 植物总RNA 提取试剂盒 盒 1280 RT-PCR试剂盒 盒 1500 合计
购置数量
1 10 5
3 1 3 1 2
金额(元)
1400 9000 1500
3000 800 1080 1280 3000 248270
5、组织培养试剂，共计约3.55万元。 名称
Ammonium sulfate 硫酸铵 Potassium phosphate monobasic KH2PO4 Potassium nitrate KNO3 MYO-INSOSITOL 肌醇 Magnesium sulfate heptahydrate 硫酸镁
Phytagel™ 琼脂粉
N-Z-Amine 水解酪蛋白 Kinetin MgCl2.6H2O 氯化镁 氯化钙 胰蛋白胨 酵母粉 琼脂粉 葡萄糖 蔗糖 麦芽糖 合计
单位 单价(元) 购置数量 金额(元)
瓶 1190 1 1190
瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶 瓶
1390 4260 4650 3220 1350 1580 5050 1580 3600 300 150 52 15 22 200
1 1 2 1 2 1 1 1 1 2 2 5 5 4 2
1390 4260 9300 3220 2700 1580 5050 1580 3600 600 300 260 75 88 400 35593
6、抗生素，共计约2.22万。
名称 潮霉素 头孢霉素 羧苄青霉素 利福平
单位 单价(元)
瓶 700 瓶 550 瓶 2500 瓶 850
购置数量
8 5 4 4
金额(元)
5600 2750 10000 3400 卡那霉素 氨苄青霉素 合计
瓶 瓶
30 30 8 8 240 240 22230
7、实验室耗材，共计约1.58万。 名称 玻璃拖把 乳胶滴头 乳胶管6*9 1000ml塑料烧杯 1000ml玻璃烧杯 500ml玻璃烧杯 5ml可调定量加液器 5ml玻璃刻度吸管 10ml玻璃刻度吸管 150ml玻璃锥形瓶 100ml消煮管 25ml玻璃刻度试管 10ml塑料离心管
玻璃棒
有机试管架25*30 试管刷 玻璃试管 玻璃三角瓶 玻璃试剂瓶 塑料量筒 塑料烧杯 一次性过滤器
X光片 液氮(35L) 冻存盒,离心管盒,离心管架
密封塑料盒 100格冷冻盒 冻存管(2ML) 封口膜 硅胶塞24-28 硅胶塞27-31 三角烧瓶(1000ML) 三角烧瓶(100ML) 双面离心管架 水银温度计 定性滤纸
单位 单价(元) 个 3 个 0.13 个 3.6 个 3.73 个 10.2 个 5.5 支 40.5 支 5 支 5.1 个 4.1 个 8.4 支 1.94 个 20 支 1 个 34.6 个 2 支 1.5 个 4 个 12 个 10 个 10 个 7 个 260 个 150 个 12 个 30 个 8 个 2.5 个 200 个 1.9 个 2.7 个 600 个 9.8 个 2.5 支 8.5 个
1.3
购置数量
金额(元)
5 15 10 1.3 5 18 5 18.65 5 51 5 27.5 1 40.5 1 5 1 5.1 1 4.1 1 8.4 9 17.46 45 900 45 45 45 1557 9 18 18 27 18 72 18 216 18 180 18 180 45 315 4 1040 9
1350
9 108 4 120 4 32 230 575 4 800 45 85.5 45 121.5 1 600 4 39.2 4 10 8 68 45
58.5 药匙
一次性注射器
0.2mlPCR管 1000个/包 96孔PCR板 10块/包 1.5ml离心管 500个/盒 2ml离心管 500个/盒 96孔PCR硅胶密封硅胶盖
一次性无菌细菌培养皿
玻璃培养皿
吸嘴(10ul，100ul)1000个/袋
吸嘴(1000ul)1000个/袋
合计
个 个 包 包 盒 盒 个 个 个 袋 袋
4 0.7 33 4 7 7 5 1 0.8 3.5 40
45 186 50 465 50 45 8 800 40 40 40
180 130.2 1650 1860 350 315 40 800 32 140 1600 15826.91
第四篇：分子生物学实验室常用有毒药品.
分子生物学实验室有毒常用药品
1. 溴化乙锭(EB :具有强诱变致癌性,使用时一定要戴一次性手套,注意 操作规范,不要随便触摸别的物品。
2.DEPC(焦碳酸二乙酯 :闻起来香香甜甜的 , 可是害人不眨眼 ! 一种强有力的 蛋白质变性剂 , 而且怀疑是致癌剂 . 开瓶时将瓶子远离你 , 内压可导致溅泼 . 操作 时戴合适的手套 , 穿工作服 , 并在化学通风橱里进行 . 3.PMSF(苯甲基磺酰氟 :老板说是神经毒 !!! 是一种高强度毒性的胆碱酯酶 抑制剂 . 它对呼吸道黏膜 , 眼睛和皮肤有非常大的破坏性 . 可因吸入 , 咽下或皮肤 吸收而致命 . 戴合适的手套和安全眼镜 , 始终在化学通风橱里使用 . 在接触到的情 况下 , 要立即用大量的水冲洗眼镜或皮肤 , 已污染的工作服丢弃掉 . 4. 乙腈,易挥发易燃,是一种刺激物和化学窒息剂,通风橱中远离热、火。 5. 放线菌素 D ,是一种致畸剂和致癌剂,通风橱中操作。 6.alpha-鹅膏蕈毒环肽,具有强毒性,可能致命。
7.NN-亚甲双丙烯酰胺,有毒,影响中枢神经系统,切勿吸入粉末。 8. 甲醇,有毒,能引起失明。
9. 乙酸 (浓的 :可能因为吸入或皮肤吸收而受到伤害, 要戴手套和护目镜, 最好在化学通风橱中操作。
10. 过硫酸酸铵:对粘膜和上呼吸道、眼睛和皮肤又较大危害性,吸入可致 命。操作时戴手套、护目镜。始终在通风橱中操作。
11. 氯化铯:可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。操作时戴手套和护目 镜。
12.DTT: 很强的还原剂, 散发难闻的气味。 可因吸入、 咽下或皮肤吸收而危 害健康。当使用固体或高浓度储存液时,戴手套和护目镜,在通风橱中操作。 13. 甲醛:毒性较大且易挥发, 也是一种致癌剂, 易通过皮肤吸收, 对眼睛、 粘膜和上呼吸道有刺激和损伤作用。避免一如其挥发的气雾。戴手套和护目镜。 始终在通风橱中操作。远离热、火花及明火。
14.TRIzol , 对眼睛有刺激性, 腐蚀皮肤。 有一次不小心溅出一小滴在脸上, 马上就红了, 过一会儿感觉到疼, 一周之后才好。 如果溅上, 马上用大量的水冲 洗。
大家在实验室里, 接触到的化学试剂多半都有危害性, 紫外灯, 如果离心机 不是很好的话的噪声污染, VORTEX 会导致手指需要震动,等等,所以每个人都 应该注意保护自己,而不能因为图省事或者别的什么原因而放松对安全的注意。
另外就是注意规范操作,搞微生物的尤其要注意,不要实验室感染。 15. 叠氮钠,有毒,阻断细胞色素电子运送系统 16. 氟化钠,有毒可致命,通风橱中操作
17. 放射性物质(同位素标记时 ,要戴手套,护目镜,穿工作服,最好买试 剂盒(如果有商品化的
18.beta-巯基乙醇,可致命,对呼吸道、皮肤和眼睛有伤害 19. 氨甲蝶呤,致癌和致畸
20. 甲醛,有毒,易挥发,致癌,对眼睛和呼吸道有刺激损伤,通风橱中远 离热和火 21. 双丙烯酰胺,神经毒剂,效应累积 22. 二甲胂酸钠,致癌,有毒 23. 链霉素,致癌,引起过敏反应
24. 哌啶,有毒,对眼睛和呼吸道有影响,远离热和火 25. 腐胺,易燃,有腐蚀性,远离热和火 26. 硫酸镍,致癌,引起遗传损伤 27. 肼,有毒,能爆炸,院里热和火
第五篇：分子生物学实验室的器材配置
分子生物学作为基因工程的上游技术，其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的，以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器?
1. 冰箱： 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱。
最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。
2. 培养箱：37℃恒温箱用于细菌的平板培养及分子生物学实验。
3. 恒温培养摇床：用于大肠杆菌等生物工程菌种的扩增。
4. 水浴锅：用于保温并进行各类实验。
25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。
含低温的水浴槽可以用于分子生物学的质粒与基因片段的连接等实验及用于42度的大肠杆菌感受态的热激。
5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。
6. 超纯水机：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高，用自来水、蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。
7. 蒸汽消毒锅：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒。
8. 滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。
9.各种天平：台秤、精密电子分析天平，用于精确称量各类试剂。
10.液体体积的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等。
11.pH计：测定溶液中H+的直接电位的仪器，主要通过一对电极，在不同的pH溶液中产生不同的电动势用pH值表示出来;pH试纸：只适用于培养液、酚饱和液、缓冲液或其它试剂溶液的pH值的粗略估计。而大部分试剂的配制要求严格的pH值，需精确度高(小数点后两位)的pH计。
12. 分光光度计：光密度、分光光度计是利用物质在可见光和紫外线区域中的吸收光谱来鉴定该物质的性质及其含量的一种仪器。它是由光源、单色器、吸收池、接收器、测量仪表或显示屏幕所组成。OD值是许多溶液中溶质定量的方便指标之一，通过所产生的单色光而测定某一溶液对该单色光的吸收值，利用它可进行核酸溶液定量和纯度的初步判断。OD值也可以作为菌浓的检测指标。
13. 高速离心机：最大转速25000 r/m ，最大离心力89000g。有冷冻和常温两种，多用于制备和手收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸铵沉淀物以及免疫沉淀物等。
14.超净工作台：内有紫外灯、照明灯、还应有酒精灯火焰、75%乙醇等灭菌的设备，是一种提供局部洁净度的设备。其原理是鼓风机驱动空气，经过低、中效的过滤器后，通过工作台面，使实验操作区域成为无菌的环境。
15.电泳系统：电泳技术是检测、鉴定各种生物大分子的纯度、含量及描述它们的特征，甚至还是分离、纯化、回收和浓缩样品的工具之一。
电泳系统分为电源和电泳槽，电源需经稳流通过稳压器，既能提供稳定的直流电，又能输出稳定的电压;水平式电泳槽：一般分为微型电泳槽和大号水平式电泳槽
16.PCR仪：Polymerase Chain Reaction仪，也称DNA热循环仪，基因扩增仪，它是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括在三种不同温度进行的DNA变性，引物复性，DNA聚合酶催化的延伸反应三个过程。需要说明的是，有些实验室可能还需要梯度PCR仪或实事定量荧光PCR仪来进行一些特殊的分子生物学实验。
17.凝胶成像分析系统：不用紫外和EB、操作安全、直接读取数据。
18.其他设备
1. 微波炉：便于一些溶液的快速加热和定温加热，电泳琼脂糖凝胶配制、溶化等。
2. 制冰机：用于制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境，以减少核酸酶或蛋白质酶的水解。
3. 层析装置：(色谱分离)是一种分离多组分混合物的有效物理方法。
真空印记系统，DNA合成/测序仪：这些都是对核酸进行深入研究的必备仪器。
4. 磁力搅拌器：多角度旋转混匀器、快速振荡混合器：用于混合仪器。
5. 组织匀浆器：超声组织及细胞破碎器，用其进行样品的分离提纯实验。
6. 通风橱：很多溶剂能逸出毒气，必备柜 ，放射性试验还要有有机玻璃屏蔽。
7. 玻璃蒸馏器、电热加帽、变压器：用于酚等有机溶剂的蒸馏。
8. Tip头、Eppendorf管：
微管移液器tip头(吸液尖)、Eppendorf管(微量离心管)可洗涤，硅化消毒后反复使用。对一些要求严格的实验，如RNA的提取、保存等操作，应使用新的消毒tip头与Eppendorf管。另外还应备有常用规格的离心管(1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的细胞培养塑料平板等。
9. 小型设备、用具：
定时器、滤膜、保鲜膜、防护眼镜鸭嘴镊;常规的玻璃或塑料器皿，包括平皿、试管、烧杯、量瓶、试剂分液漏斗、避光保存的试剂应使用棕色试剂瓶，如饱和酚、巯基乙醇等;记号笔、各种手套(PE、乳胶、家用、防酸的等)。