ELISA方法检测乙肝表面抗原假阳性一例
1 临床资料
患者:男, 45岁。2010年9月16日来我院内科门诊做健康体检。门诊检查血压、心率正常, 无既往病史。心电图正常, 肝胆B超未见异常。患者于清晨空腹以真空采血管按要求定量采血检测血常规、肝、肾功能及乙肝二对半, 按常规操作分离血清, 无溶血、乳糜及黄疸等。
实验室检测结果:血、尿常规检测正常;生化肝、肾功能指标正常。用ELISA方法检测乙肝二对半结果为HBs Ag (+) ;HBs Ab (+) ;HBe Ag (-) ;HBe Ab (-) ;HBc Ab (-) 。再用ELISA方法复查, 仍为此种模式。改用金标方法复查HBs Ag, 结果为 (-) 。我们又检测了该标本的HBV-DNA含量, 结果为低于检测值下线。
本次ELISA试剂为英科新创 (厦门) 科技有限公司生产, 批号2010035104, 有效期20110310;金标试剂为英科新创 (厦门) 科技有限公司生产, 批号2010064211, 有效期201106;HBV-DNA检测试剂为中山大学达安基因股份有限公司生产, 批号2010004, 有效期20110216。
2 讨论
ELISA方法检测HBs Ag假阳性的报道有过。从文献上看, 引起假阳性的原因有很多。大体上分标本、试剂、操作等因素[1]。试剂的因素可通过改换试剂批号、试剂厂家来避免;操作的因素可通过严格按照操作规程、树立严谨的工作作风、提高手工操作的熟练程度、严格做好室内质控和阴阳性对照、制定灰色区, 对在灰色区范围内的结果必须进行复查等来避免。对于标本自身的影响因素, 我们在排除了如标本前期处理、保存不当 (污染、溶血、凝集不全等) 、添加抗凝剂等[2]原因, 由于标本内在的因素, 即内源性干扰物质引起的假阳性是不易避免的。有报道称大约40%的人体血清标本中含有非特异性干扰物质, 如类风湿因子、补体、自身抗体、甲胎蛋白及其他交叉反应物质等, 但由此引起的假阳性结果A值往往较低[3]。
因此, 遇到HBs Ag单独阳性或HBs Ag阳性的二对半少见模式应引起重视, 最好是换一种方法的试剂进行复查。最简单易行的方法就是用质量较好的金标试剂复查, 确保检验结果的准确性。
摘要:目的 探讨ELISA方法检测乙肝表面抗原的影响因素。方法 用ELISA方法、免疫金标法和PCR-HBV-DNA方法分别检测1例患者血样。结果 ELISA方法检测为乙肝二对半HBsAg (+) ;HBsAb (+) ;HBeAg (-) ;HBeAb (-) ;HBcAb (-) , 免疫金标法检测为HBsAg (-) , HBV-DNA检测结果为低于检测下线。结论 用ELISA方法检测乙肝表面抗原影响因素较多, 对于HBsAg单独阳性或HBsAg阳性的乙肝二对半少见模式应重视复查, 以确保检验结果的准确性。
关键词:ELISA方法,乙肝表面抗原,假阳性
参考文献
[1] 叶千红, 张丽霞.关于标本因素对ELISA检测结果影响的分析[J].中国实验诊断学, 2003, 7:440~441.
[2] 张家均.酶联免疫吸附法测乙肝病毒表面抗原假阳性原因的分析及解决方法[J].现代检测医学杂志, 2005, 20:88.
[3] 许斌, 朱虎定.ELISA检测HBsAg影响因素的探讨[J].临床检验杂志, 2000, 18:232.