欧盟临床试验论文提纲
论文题目：烯丙孕素内服溶液的临床药理学与靶动物安全性研究
摘要：烯丙孕素（altrenogest,ALT）是一种人工合成的甾类孕激素,通过抑制促性腺激素分泌而调整母畜发情周期,在欧盟和美国批准用于母猪同期发情。因烯丙孕素解决了母猪批次化生产的关键技术,且内服给药方便,欧美国家将其作为现代养猪生产中必不可少的同期发情调控剂。因此,研发烯丙孕素仿制药对促进我国养猪业的集约化发展具有重要意义。本研究开展了0.4%烯丙孕素内服溶液的药代动力学、临床药效、靶动物安全性和残留消除试验,评价其调控母猪同期发情的有效性和安全性,制定了给药方案和休药期,为其新兽药注册和临床合理应用提供了科学依据。1烯丙孕素内服溶液在猪体内的药代动力学研究16头健康母猪采用双处理、两周期随机交叉试验设计,进行烯丙孕素内服溶液和进口制剂单剂量给药的比较药动学研究。采用高效液相色谱-串联质谱法检测猪血浆中烯丙孕素,所得血药浓度-时间数据用Winnonlin5.2药动学软件处理。受试药物的主要药动学参数:峰浓度（Cmax）为227.59±83.35 ng/mL,达峰时间（Tmax）为1.16±0.52h,消除半衰期（t1/2）为3.63±0.72 h,平均滞留时间（MRT）为5.02±0.79 h,药时曲线下面积（AUC）为1060.82±410.74（ng/mL）·h;进口制剂的主要药动学参数:Cmax为152.83±80.34 ng/mL,Tmax为 1.58±0.85 h,t1/2为 3.45±0.63 h,MRT为 5.21±0.87 h,AUC为 786.09±401.91（ng/mL）·h。受试药物的 Cmax显著高于进口制剂（P＜0.05）,t1/2、Tmax、AUC和MRT等参数无统计学差异（P＞0.05）。与进口制剂相比,受试药物的相对生物利用度（F）为134.95%。研究结果表明,受试药物具有与对照药物相似的药代动力学特征,且吸收与利用程度更佳。2烯丙孕素内服溶液的临床药效学研究为评价烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床应用效果,选取性成熟的后备母猪191头进行剂量测定试验和扩大临床试验,根据母猪发情及妊娠情况评价其临床药效。在剂量测定试验中,空白对照组以及烯丙孕素内服溶液低（10 mg/d）、中（20 mg/d）和高（25 mg/d）剂量处理组母猪从停药到发情的间隔时间分别为11.71±5.39 d、5.21±2.65 d、3.35±0.66 d 和 3.45±0.81 d,发情率分别为 70%（7/10）、95%（19/20）、100%（20/20）、和100%（20/20）,各用药组的发情间隔与空白对照组相比显著缩短（P＜0.05）,据此将推荐剂量定为20 mg/d。在扩大临床试验中,受试药物组和对照药物对照组的母猪发情间隔分别为3.59±1.07 d和3.75±1.22 d,发情率分别为96.72%（59/61）和98.33%（59/60）,两种药物处理均表现出良好的同期发情效果且无显著差异。上述研究表明,受试药物按推荐剂量（20mg/d）连续给药18d,可以调控母猪达到良好的同期发情效果。3烯丙孕素内服溶液对母猪安全性研究为评价烯丙孕素内服溶液对靶动物母猪的安全性,选取健康母猪24头,随机分为4组,分别为3个给药组和空白对照组,给药组分别按20mg/d、60 mg/d、100mg/d剂量（即1倍、3倍、5倍推荐剂量）内服给药,连续18 d,比较给药前后的临床体征、血常规指标、血清生化指标及组织病理学变化。结果显示:试验期间各组别母猪临床表现正常,给药后的血常规和血清生化指标均在正常范围内波动,受试药物在5倍推荐剂量（100mg/d）范围内对母猪血液生理生化功能和主要脏器未造成明显不良影响。试验结果表明,受试药物按临床推荐剂量（20 mg/d）内服给药,对靶动物母猪的临床体征、血液学和血液生化指标无明影响,临床应用安全。4烯丙孕素内服溶液在猪体内的残留消除研究为制定休药期,选用20头后备母猪进行烯丙孕素内服溶液残留消除试验。每头猪按临床推荐剂量（20 mg/d）内服给药,连续给药18 d,分别于停药后6 h、1d、5 d、10 d和18 d各随机屠宰4头猪,采集肌肉、肝脏、肾脏、皮脂等组织样品,采用经验证的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定猪可食性组织中烯丙孕素残留量,将测得的各组织中烯丙孕素残留量采用WT1.4休药期软件计算休药期。试验结果显示,停药6h后肝脏中药物残留量最高,为240.75μg/kg,其次依次是皮脂、肌肉、肾脏,平均残留量分别为137.30 μg/kg、41.13μg/kg、40.62μg/kg。停药1d时,肝脏、皮脂、肾脏和肌肉中平均残留量分别降至72.93 μg/kg、33.75 μg/kg、19.63 μg/kg和8.95μg/kg。停药5 d时,4头猪中仅两头猪肝脏中的烯丙孕素残留量高于最高残留限量（MRL）,分别为6.59 μg/kg和2.88 μg/kg,所有猪的肾脏、皮脂和肌肉中烯丙孕素残留量均低于检测限（LOD）。停药10 d时,所有组织中烯丙孕素残留量低于LOD。研究结果表明,肝脏是烯丙孕素在猪体内残留靶组织,建议烯丙孕素内服溶液的休药期为9 d。
关键词：烯丙孕素内服溶液;药代动力学;临床药效;靶动物安全性;残留消除;母猪
学科专业：兽医博士（专业学位）
摘要
Abstract
符号说明
第一章 文献综述: 烯丙孕素的研究进展
1 理化性质
2 研制与应用概况
3 作用机理
4 药代动力学
4.1 血液中烯丙孕素检测方法
4.2 烯丙孕素在动物体内的药代动力学
5 毒理学
5.1 急性毒性研究
5.2 生殖毒性研究
5.3 遗传毒性和致癌试验研究
5.4 环境毒理学研究
5.5 靶动物安全性研究
6 临床应用
6.1 用于同步发情
6.2 用于提高动物繁殖性能
6.3 用于维持妊娠
6.4 用于抑制发情
7 残留消除
7.1 动物源性食品中烯丙孕素残留检测
7.2 残留消除动力学
8 本研究的目的与意义
参考文献
第二章 烯丙孕素内服溶液在猪体内的药代动力学研究
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
1.2 主要仪器设备
1.3 试验动物
1.4 动物分组与给药
1.5 血样采集
1.6 试液的配制
1.7 血浆中烯丙孕素含量检测方法的建立
1.8 数据分析
2 结果
2.1 血浆标准曲线
2.2 检测限和定量限
2.3 回收率和精密度
2.4 方法的专属性
2.5 稳定性试验
2.6 烯丙孕素内服溶液在猪体内的药代动力学特征
3 讨论
3.1 血浆中烯丙孕素的检测方法
3.2 烯丙孕素内服溶液在猪体内的药动动力学特征
参考文献
第三章 烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床药效研究
1 材料与方法
1.1 试验药品
1.2 试验动物
1.3 试验动物选择与淘汰
1.4 试验动物饲养管理
1.5 剂量测定试验
1.6 扩大临床试验
1.7 给药方法
1.8 发情鉴定和人工授精
1.9 临床药效评价
1.10 数据处理
2 结果
2.1 剂量测定试验
2.2 扩大临床试验
3 讨论
3.1 烯丙孕素内服溶液的临床应用现状及给药方案
3.2 烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床效果
参考文献
第四章 烯丙孕素内服溶液对母猪的靶动物安全性研究
1 材料与方法
1.1 试验药品
1.2 主要仪器设备及试验耗材
1.3 试验动物
1.4 试验动物选择与淘汰
1.5 试验动物饲养管理
1.6 试验动物分组与给药
1.7 临床观察
1.8 血常规指标与血清生化指标测定
1.9 尸体剖检与组织病理学检查
1.10 数据处理
2 结果
2.1 临床表现
2.2 血常规指标与血清生化指标
2.3 组织病理学变化
3 讨论
参考文献
第五章 烯丙孕素内服溶液在猪体内残留消除研究
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
1.2 主要仪器设备
1.3 试剂配制
1.4 试验动物及饲养管理
1.5 给药与采样
1.6 猪可食性组织中烯丙孕素残留量检测方法的建立
1.7 猪可食性组织中烯丙孕素残留量的测定
1.8 数据处理
2 结果
2.1 方法的专属性
2.2 基质匹配标准曲线
2.3 检测限和定量限
2.4 回收率和精密度
2.5 稳定性试验
2.6 猪可食性组织中烯丙孕素残留量
2.7 烯丙孕素内服溶液按推荐给药方案的休药期
3 讨论
3.1 猪可食性组织中烯丙孕素残留的检测方法
3.2 烯丙孕素在猪组织中的残留消除规律及休药期
参考文献
全文结论
致谢