范文网 作文大全 【基本染色方法】常用的染色方法(大全)

【基本染色方法】常用的染色方法(大全)

【基本染色方法】常用的染色方法基本染色方法更新时间:2005-12-20 浏览次数:37一、革兰染色本染色是最基本的染色法,可用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰阳性(紫色)和革兰阴性(红色)两类。原理:1、 等电点学说。2、 化。

【基本染色方法】常用的染色方法

基本染色方法

更新时间:2005-12-20 浏览次数:37

一、革兰染色

本染色是最基本的染色法,可用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰阳性(紫色)和革兰阴性(红色)两类。

原理:

1、 等电点学说。

2、 化学学说。

3、 通透性学说。

试剂

1、结晶紫溶液

A液: 结晶紫 2g

95%乙醇 20ml

B液: 草酸铵 0.8g

蒸馏水 80ml

需在用前24 h将A液,B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。

2、碘液

碘 1g

碘化钾 2g

蒸馏水 300ml

将碘与碘化钾混合并研磨,加入少量水,使其逐渐溶解,然后研磨,继续加入少量蒸馏水至完全溶解。最后补足水量。

也可用少量蒸馏水,先将碘化钾完全溶解,再加入碘片,待完全溶解后,加水至300ml。

3、脱色液:95%乙醇

4、复染液

A:贮存液:沙黄 2.5g

95%乙醇 100ml

B:应用液:A液 10ml

蒸馏水 90ml

(应用液也可用:石炭酸复红10ml加90ml蒸馏水)

染色方法

1、涂片经火焰固定,加结晶紫液染1min,清水冲去染液。(用滤纸吸去玻片上水分)

2、加碘液染1min,水洗。(吸去水分)

3、加脱色液,不时摇动约10~30秒,至无紫色脱落为止,水洗。(吸去水分)

4、加复染液,染30秒,水洗。(吹干)

5、镜检。

二、抗酸染色

抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当增加标本涂片的厚度,以提高检出率。厚涂片时,须掌握染色时间。如果背景过深,影响镜检。(厚涂片的同时,涂薄片一张)。

原理

分枝杆菌细胞壁含脂质较多其中主要成份为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的。

试剂

1、萋纳石炭酸复红溶液

碱性复红乙醇饱和溶液(碱性复红8克,溶于95%乙醇100亳升)

碱性复红乙醇饱和溶液: 10ml

5%石炭酸溶液: 90ml

2、脱色剂: 浓盐酸 3ml

95%乙醇 97ml

3、复染液(吕弗勒美蓝液)

美蓝乙醇饱和溶液(美蓝0.3g,溶于95%乙醇30ml中)

美蓝乙醇饱和溶液: 30ml

20%氢氧化钾: 0.1ml

蒸馏水: 100ml

染色方法

1、涂片经火焰固定,加石炭酸复红溶液,徐徐加热至有蒸汽出现,

切不可沸腾。染5 分钟(若染色奴卡菌需要延长时间),水洗(吸去水份)。

2、加脱色剂,不时摇动玻片至无色脱落为止,水洗(吸去水份)。

3、加复染液,染0.5~1分钟,水洗,吹干。

4、镜检。分枝杆菌呈红色,背景为蓝色。

三、异染颗粒染色

用于白喉棒状杆菌染色,异染颗粒可明显地被显示出来。

试剂

甲液: 甲苯胺蓝 0.15g

孔雀绿 0.2g

冰醋酸 1ml

95%乙醇 2ml

蒸馏水 100ml

将各染料先溶于乙醇,然后加入水与冰醋酸的混合液中,充分混合。静置24小时后过滤备用。

乙液: 碘 2g

碘化钾 3g

蒸馏水 300ml

先将碘化钾加入少许蒸馏水(约2ml),充分振摇,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解后,加蒸馏水至300ml。

染色方法

1、涂片经火焰固定,加甲液,染3~5分钟,水洗(吸去水份)。

2、滴加乙液,染1分钟,水洗,吹干。

3、镜检,菌体呈绿色,异染颗粒呈蓝黑色。

四、墨汁染色

用于观察菌体有无荚膜结构,借此鉴定某些细菌,如新型隐球菌

试剂:

印度墨汁、国产优质墨汁或5%黑色素水溶液。

染色方法:

将标本与1 滴染色液在载玻片上混合,加上盖玻片,轻轻压一下使标本混合液变薄(尽量避免产生气泡),在低倍镜下寻找有荚膜的菌细胞。找到后,转换高倍镜确认。

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